কিভাবে সর্বোত্তম ঘনত্ব নির্ধারণ করতে?
প্রবর্তক IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside) এর জন্য, ঘনত্ব যত বেশি, তত ভাল।সর্বোত্তম ঘনত্ব নির্দিষ্ট পরীক্ষামূলক অবস্থা এবং পছন্দসই আনয়ন প্রভাবের উপর নির্ভর করে।
সাধারণত, IPTG এর ঘনত্ব 0.1-1 মিমি পরিসরে ব্যবহৃত হয়।নিম্ন ঘনত্ব কোষের বৃদ্ধির উপর প্রতিকূল প্রভাব কমাতে পারে এবং লক্ষ্য প্রোটিনের অতিরিক্ত এক্সপ্রেশনের কারণে সাইটোটক্সিসিটি কমাতে পারে।উচ্চতর ঘনত্ব কোষের অত্যধিক বিপাকীয় বোঝা সৃষ্টি করতে পারে, যা কোষের বৃদ্ধি এবং প্রকাশের দক্ষতাকে প্রভাবিত করে।
সর্বোত্তম ঘনত্ব নির্ধারণের উপায় হল বিভিন্ন ঘনত্বে IPTG আনয়ন পরীক্ষা পরিচালনা করে লক্ষ্য প্রোটিনের অভিব্যক্তি স্তরের মূল্যায়ন করা।আইপিটিজি ঘনত্বের একটি পরিসীমা (যেমন 0.1 মিমি, 0.5 মিমি, 1 মিমি, ইত্যাদি) ব্যবহার করে ছোট আকারের সংস্কৃতি পরীক্ষা করা যেতে পারে এবং লক্ষ্য প্রোটিনের অভিব্যক্তি স্তর সনাক্ত করে বিভিন্ন ঘনত্বে অভিব্যক্তি প্রভাব মূল্যায়ন করা যেতে পারে (যেমন পশ্চিমী দাগ বা ফ্লুরোসেন্স সনাক্তকরণ)।পরীক্ষামূলক ফলাফল অনুসারে, সর্বোত্তম অভিব্যক্তি প্রভাব সহ ঘনত্বকে সর্বোত্তম ঘনত্ব হিসাবে নির্বাচিত করা হয়েছিল।
এছাড়াও, আপনি অনুরূপ পরীক্ষামূলক অবস্থার অধীনে সাধারণভাবে ব্যবহৃত IPTG ঘনত্বের পরিসর বোঝার জন্য প্রাসঙ্গিক সাহিত্য বা অন্যান্য পরীক্ষাগারের অভিজ্ঞতাও উল্লেখ করতে পারেন এবং তারপর পরীক্ষামূলক প্রয়োজন অনুসারে অপ্টিমাইজ এবং সামঞ্জস্য করতে পারেন।
এটি লক্ষ করা গুরুত্বপূর্ণ যে সর্বোত্তম ঘনত্ব বিভিন্ন এক্সপ্রেশন সিস্টেম, লক্ষ্য প্রোটিন এবং পরীক্ষামূলক অবস্থার উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হতে পারে, তাই কেস-বাই-কেস ভিত্তিতে অপ্টিমাইজ করা ভাল।
পোস্টের সময়: সেপ্টেম্বর-28-2023