4-নাইট্রোফেনাইল বিটা-ডি-গ্যালাকটোপিরানোসাইড CAS:200422-18-0

প্রভাব: ONPG একটি সাবস্ট্রেট যা বিশেষভাবে এনজাইম β-galactosidase এর উপস্থিতি এবং কার্যকলাপ সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়।যখন β-galactosidase এনজাইম উপস্থিত এবং সক্রিয় থাকে, তখন এটি ONPG কে দুটি পণ্যে বিভক্ত করে: ও-নাইট্রোফেনল এবং একটি গ্যালাকটোজ ডেরিভেটিভ।ও-নাইট্রোফেনলের মুক্তির ফলে হলুদ রঙের পরিবর্তন হয়, যা একটি স্পেকট্রোফটোমিটার ব্যবহার করে পরিমাপ করা যায়।

আবেদন: ONPG এর আণবিক জীববিজ্ঞান এবং জৈব রসায়ন গবেষণায় বেশ কয়েকটি অ্যাপ্লিকেশন রয়েছে:

β-galactosidase কার্যকলাপের নির্ণয়: ONPG সাধারণত β-galactosidase এনজাইমের কার্যকলাপ পরিমাপ এবং পরিমাপ করতে ব্যবহৃত হয়।ও-নাইট্রোফেনল গঠনের হার, যা এনজাইমের কার্যকলাপের সাথে সরাসরি সমানুপাতিক, বর্ণালী ফোটোমেট্রিকভাবে পরিমাপ করা যেতে পারে।

জিনের অভিব্যক্তি এবং নিয়ন্ত্রণ: ONPG প্রায়শই জিনের অভিব্যক্তি এবং নিয়ন্ত্রণ অধ্যয়নের সাথে সম্পর্কিত পরীক্ষায় ব্যবহার করা হয়।এটি প্রায়শই ফিউশন প্রোটিন অ্যাসে ব্যবহৃত হয়, যেমন সাধারণভাবে ব্যবহৃত ল্যাকজেড ফিউশন সিস্টেম, নির্দিষ্ট প্রবর্তকদের নিয়ন্ত্রণে জিনের অভিব্যক্তি অধ্যয়ন করতে।ONPG ব্যবহার করে পরিমাপ করা বিটা-গ্যালাক্টোসিডেস কার্যকলাপ জিনের অভিব্যক্তির স্তরের অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে।

β-গ্যালাক্টোসিডেস কার্যকলাপের জন্য স্ক্রীনিং: ONPG কে রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তিতে একটি কালোরিমেট্রিক স্ক্রীনিং পদ্ধতি হিসাবে LacZ জিনের উপস্থিতি এবং কার্যকারিতা সনাক্ত করতে ব্যবহার করা যেতে পারে, যা β-galactosidase এনকোড করে।এই স্ক্রীনিং পদ্ধতিটি ক্লোন শনাক্ত করতে সাহায্য করে যাতে আগ্রহের জিন থাকে।

এনজাইম গতিবিদ্যা অধ্যয়ন: ONPG β-galactosidase এনজাইমের গতিবিদ্যা অধ্যয়ন করতেও কার্যকর।বিভিন্ন সাবস্ট্রেটের ঘনত্বে এনজাইম-সাবস্ট্রেট বিক্রিয়ার হার পরিমাপ করে, মাইকেলিস-মেন্টেন ধ্রুবক (কিমি) এবং সর্বাধিক প্রতিক্রিয়া হার (ভিম্যাক্স) এর মতো গতিগত পরামিতি নির্ধারণ করা সম্ভব।