৪-নাইট্রোফেনিল বিটা-ডি-গ্যালাক্টোপাইরানোসাইড সিএএস:২০০৪২২-১৮-০

প্রভাব: ONPG হলো একটি সাবস্ট্রেট যা বিশেষভাবে β-galactosidase নামক এনজাইমের উপস্থিতি এবং কার্যকলাপ শনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়। যখন β-galactosidase এনজাইম উপস্থিত এবং সক্রিয় থাকে, তখন এটি ONPG-কে ভেঙে দুটি উৎপাদে পরিণত করে: o-nitrophenol এবং একটি গ্যালাকটোজ ডেরিভেটিভ। o-nitrophenol নির্গত হওয়ার ফলে এর রঙে হলুদ পরিবর্তন ঘটে, যা একটি স্পেকট্রোফটোমিটার ব্যবহার করে পরিমাপ করা যায়।

প্রয়োগ: আণবিক জীববিজ্ঞান এবং জৈব রসায়ন গবেষণায় ONPG-এর বিভিন্ন প্রয়োগ রয়েছে:

বিটা-গ্যালাক্টোসিডেজ এনজাইমের সক্রিয়তা নির্ণয়: বিটা-গ্যালাক্টোসিডেজ এনজাইমের সক্রিয়তা পরিমাপ ও পরিমাণ নির্ণয়ের জন্য সাধারণত ONPG ব্যবহার করা হয়। ও-নাইট্রোফেনল তৈরির হার, যা এনজাইমের সক্রিয়তার সাথে সরাসরি সমানুপাতিক, তা স্পেকট্রোফটোমেট্রিকভাবে পরিমাপ করা যায়।

জিন অভিব্যক্তি ও নিয়ন্ত্রণ: জিন অভিব্যক্তি ও নিয়ন্ত্রণ সম্পর্কিত গবেষণায় প্রায়শই ONPG ব্যবহার করা হয়। নির্দিষ্ট প্রোমোটারের নিয়ন্ত্রণে থাকা জিনগুলোর অভিব্যক্তি অধ্যয়নের জন্য এটি প্রায়শই ফিউশন প্রোটিন অ্যাসে-তে, যেমন বহুল ব্যবহৃত lacZ ফিউশন সিস্টেমে, ব্যবহৃত হয়। ONPG ব্যবহার করে পরিমাপ করা বিটা-গ্যালাক্টোসিডেজ অ্যাক্টিভিটি জিন অভিব্যক্তির মাত্রা সম্পর্কে ধারণা দেয়।

বিটা-গ্যালাক্টোসিডেজ সক্রিয়তার স্ক্রিনিং: রিকম্বিন্যান্ট ডিএনএ প্রযুক্তিতে বিটা-গ্যালাক্টোসিডেজ এনকোডকারী LacZ জিনের উপস্থিতি ও কার্যকারিতা শনাক্ত করার জন্য ONPG-কে একটি কালারমেট্রিক স্ক্রিনিং পদ্ধতি হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে। এই স্ক্রিনিং পদ্ধতিটি কাঙ্ক্ষিত জিন ধারণকারী ক্লোন শনাক্ত করতে সাহায্য করে।

এনজাইম গতিবিদ্যা অধ্যয়ন: β-গ্যালাক্টোসিডেজ এনজাইমের গতিবিদ্যা অধ্যয়নের জন্যও ONPG উপযোগী। বিভিন্ন সাবস্ট্রেট ঘনমাত্রায় এনজাইম-সাবস্ট্রেট বিক্রিয়ার হার পরিমাপের মাধ্যমে মাইকেলিস-মেন্টেন ধ্রুবক (Km) এবং সর্বোচ্চ বিক্রিয়ার হার (Vmax)-এর মতো গতিবিদ্যাগত পরামিতিগুলো নির্ধারণ করা সম্ভব।